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  • 重组乙型肝炎疫苗（酵母）体外相对效力检查法
    重组乙型肝炎疫苗（酵母）体外相对效力检查法
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    发布时间： 2022 - 11 - 07
    本法系以酶联免疫吸附法测定供试品中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）含量，并以参考品为标准，采用双平行线分析法计算供试品的相对效力。　　试剂  (1)PBS（pH7.2）  称取氯化钠8.850g、磷酸二氢钠（NaH2PO4・2H2O）0.226g和磷酸氢二钠（Na2HPO4・12H2O）1.698g，加适量水溶解，调pH值至7.2，加水稀释至1000ml。　　(2)供试品处理液  量取20%二乙醇胺1.25ml和10%Triton X-100 0.20ml，加PBS 8.55ml，混匀备用。　　(3)供试品稀释液  称取牛血清白蛋白10.0g，加PBS溶解并稀释至1000ml，备用。　　参考品溶液及供试品溶液的制备  精密量取参考品及供试品各0.1ml，分别加入0.1ml供试品处理液，加盖混匀，在20～28℃静置30～35分钟。将处理后的参考品和供试品分别以供试品稀释液进行适当稀释，稀释后取1∶2000、1∶4000、1∶8000、1∶16000、1∶32000及其他适宜稀释度进行测定，每个稀释度做双份测定。阴性对照为供试品稀释液（双份），阴性对照和阳性对照均不需稀释。　　测定法  按试剂盒使用说明书进行。试剂盒阴性和阳性对照的吸光度均值应在试剂盒要求范围内，试验有效。3次测定的数据均用量反应平行线测定法（通则1431）计算相对效力。以3次相对效力的几何均值为其体外相对效力。以参考品为标准，供试品相对效力应不小于0.5，判为合格。
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