本法系将有机磷转变为无机磷后进行磷含量测定。磷酸根在酸性溶液中与钼酸铵生成磷钼酸铵,遇还原剂即生成蓝色物质(三氧化钼和五氧化钼的混合物),称之为“钼蓝”,用比色法测定供试品中磷含量。
测定法 精密量取供试品适量(含磷4~20μg)置试管中,加4滴硫酸(约0.08ml)加热至炭化,再加2滴高氯酸(约0.06ml)消化至无色澄清,消化完全后稍置片刻,立即加水2ml,加0.04mol/L钼酸铵溶液(称取钼酸铵5g,加水溶解并稀释至100ml)0.4ml,混匀;加还原剂(称取亚硫酸氢钠6g、亚硫酸钠1.2g、1-氨基-2-萘芬-4-磺酸0.1g,置棕色瓶中,加水至50ml,1周内使用)0.2ml,混匀;加水至6ml,15~20分钟后,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在波长820nm处测定吸光度。
精密量取标准磷溶液(精密称取干燥至恒重的磷酸二氢钾439.3mg,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度;再精密量取2ml,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,即得每1ml含磷20μg的标准磷溶液)0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,分别置试管中,各补加水至1ml,自本法前述“加4滴硫酸”起,同法操作,测定各管的吸光度。
以标准磷溶液的系列浓度对其相应的吸光度作直线回归,然后将供试品溶液的吸光度代入直线回归方程,求岀其相应体积(ml)。