三氧化二硼是硼硅类药用玻璃的主要成分之一。本法系将玻璃容器经碱熔融和酸反应后，再用碳酸钙使硼形成易溶于水的硼酸钙，并与其他元素分离；加入甘露醇使硼酸定量地转变为醇硼酸，用氢氧化钠滴定醇硼酸，根据消耗氢氧化钠滴定液的浓度和体积，计算玻璃及其容器所含的三氧化二硼量。
通过对硼硅类药用玻璃材料或容器中三氧化二硼含量的测定，可对玻璃材料进行鉴别与分类。
测定法 取供试品（取不带印字部位；若有污染，清洗干净），粉碎，研磨至细粉（颗粒度应小于100μm），于105~110℃烘干1小时，置于干燥器中冷却1小时。取细粉约0.5g，精密称定，置铂坩锅中，加入无水碳酸钠4g，盖上坩埚盖，在850~900℃约20分钟熔融（或置于镍坩埚中，加入氢氧化钠4g，盖上坩埚盖，置电炉上加热，待熔化后，摇动坩埚，再熔融约20分钟。旋转坩埚，使熔融物均匀地附着于坩埚内壁），放冷，用少量热水浸出熔块并转移至烧杯中，加盐酸20ml分散熔块；再用不超过15ml盐酸溶液（1→2）分次清洗坩埚和盖，洗液合并于烧杯中。待熔块完全分散后用碳酸钙中和剩余的酸，并加入过量碳酸钙4g，将烧杯放在水浴中蒸煮约30分钟后，趁热用快速
滤纸过滤，用热水分次洗涤烧杯及沉淀，总量不超过150ml，滤液中加乙二胺四乙酸二钠约1g，煮沸，取下冷却至室温，加0.2%甲基红乙醇溶液2滴，用0.1mol/L氢氧化钠溶液和0.1mol/L盐酸溶液将溶液调成中性(呈亮黄色)，加0.1%酚酞乙醇指示剂1ml和甘露醇2~3g，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定至微红色，读取消耗的体积数；加入甘露醇约1g，轻摇，如微红色褪去，再用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定至微红色，如此反复直至加入甘露醇后微红色不褪为止，读取消耗的总体积数。取相同材质坩埚同法进行空白试验，并将滴定的结果进行空白校正。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于3.481mg的B2O3。